树脂层析法与萃取法

点击数：62252016-01-07 16:38:30　来源: 大有色谱

紫杉醇(taxo1)是从红豆杉属(Taxus)植物中分离到的一种具有独特抗肿瘤活性的二萜类化合物。1979年美国Horwitz等发现其良好的抗癌活性和独特的抑制微管解聚稳定微管的作用机理。目前获得紫杉醇的主要方法还是从植物中直接提取，其提取物中紫杉醇含量极低，含有大量的植物腊、色素等杂质，特别是其中共存许多分子结构和理化性质与紫杉醇极其相近的紫杉烷类化合物¨J，给分离带来极大困难，因此，在紫杉醇精制之前，往往需要进行前处理除杂，以减轻后续处理的负担。目前常使用的前处理方法主要是液液萃取法 和固相萃取法 J，液液萃取法的除杂能力极为有限，且导致紫杉醇的较大损失；固相萃取法的缺点是处理量小、溶剂用量大、成本高，因杂质含量数万倍于紫杉醇，造成的传质阻力大，固定相对紫杉醇的吸附不彻底，紫杉醇的损失会很大。树脂法在天然产物的分离提纯方面已有广泛应用，张志强 和元进英H 等报道了阴离子交换树脂在紫杉醇分离过程中有较强的脱色作用，在此基础上，本文采用阴阳离子交换树脂串联的方法对色素等杂质进行去除，并与传统液液萃取法在除杂效果上进行了比较。

1 实验部分

1．1 仪器和试剂

LC一10A液相色谱仪(Shimadzu，日本)；二极管阵列检测器；五氟苯基柱(4．6mm×250mm)；V一530紫外分光光度计(日本)；玻璃层析柱(‘p2．0×

30cm，‘p5．0×60cm)。东北红豆杉针叶、紫杉醇对照品(西安延炼)；D280、D001一CC离子交换树脂(南开大学化工厂)；其它试剂均为分析纯或谱纯。

1-2 溶液制备

1．2．1 紫杉醇标准溶液精密称取紫杉醇对照品5mg，置于10mL容量瓶内，甲醇溶解，配成500~g：mL 贮备液，备用。

1．2．2 供试品溶液将干燥的东北红豆杉针叶粉碎，过4O目筛。称取5000g，置于提取器中，95％乙醇浸提48h，过滤，并用95％ 乙醇洗涤残渣，合并滤液和洗涤液，浓缩定容。用正己烷萃取以除去非极性和低极性杂质，弃去正己烷相供试品溶液。

1．3 实验方法

1．3．1 分析方法

色谱条件流动相为A乙腈，B水，梯度洗脱，0～15rain，B从70％ 一64％ ；15～65 rain，B从64％63．17％ ：65～80 min，B保持70％ ；流量1． 0 mL·min～，检测波长227nm。将标准液稀释成20、50、100、200、400、500~g·mL～，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2×10 一96040．R =0． 9999。

1．3．2 传统液液萃取法除杂 量取供试品溶液1L，用等体积CHC1，萃取3次，收集CHCI，相并浓缩至干，用无水乙醇200mL溶解。

1．3．3 离子交换树脂法除杂

1．3．3．1 树脂的预处理树脂用丙酮浸泡充分溶胀后装人层析柱，用丙酮淋洗至不出现浑浊。之后分别用3倍床体积(BV)的5％HC1和2％ NaOH溶

液以4～6BV·h 的流速淋洗，用去离子水洗至出水中性。

1．3．3．2 动态吸附容量的测定D280树脂20mL装人层析柱，供试品液150mL稀释3倍，上柱吸附，定时量取流出液，进行可见光扫描，确定饱和吸附终点，并绘制吸附曲线。将达到饱和前的D280流出液上DO01 cc柱吸附，可见光扫描确定饱和终点，绘制吸附曲线，确定各树脂的动态吸附容量。

1．3．3．3 柱上吸附所用树脂体积为达到饱和吸附前的用量。量取300mL D280和150mL DO01CC树脂湿法装柱，无水乙醇平衡，供试品液1L上D280

柱吸附，流速2～3 BV·h～，流出液再进行DO01CC柱吸附，流出液于40c【=浓缩蒸干，称重，用20OraL无水乙醇溶解。

1．3．4 除杂、脱色能力及紫杉醇回收率的分析杂质去除率用称重法测定。样品经可见光扫描发现，665nm处的峰最具代表性，故选择665nm为色素测定点，脱色率以A665nm为基准进行计算；紫杉醇回收率以液相色谱法定量测定。所采用公式为：杂质去除率：丝 ×100％

V／原液脱色率： ／t} ×100％665nm原液紫杉醇回收率= ×100％7n原液

2 结果及讨论

2．1 动态饱和吸附容量的测定

树脂所除去的基本是色素等杂质，其吸收主要在可见光区，因此，可采用对各流出液进行可见光扫描来确定其饱和吸附终点，并找出特征吸收峰，

测定吸光度值绘制吸附曲线。波长／rim图1 D280树脂流出液全波长扫描图渡长／nm，根据665nm 处的吸附曲线(图2)，吸光度值在270mL以后变化不大，说明吸附基本达到平衡，由此可确定D280的饱和吸附容量约为90mL供试品溶液。吸附体积在60Oral以后，吸光度值变化不大，说明树脂吸附基本达到平衡，由此可确定DO01 CC的饱和吸附容量为200mL D280流出液。综上所述，当两树脂达到饱和吸附时，树脂体积用量比例约为2．3：1。

2．2 杂质去除率、脱色率和紫杉醇回收率

2．5 加工工艺对PP性能的影响在PP加工的正常范围内，加工温度高对提高制品的韧性有好处，对刚性不利；螺杆转数对材料性能的影响与挤出温度类似；挤出机喂料量也是影响制品性能的一大因素，喂料量过低不仅生产效率低，而且造成螺杆处于饥饿状态，影响混炼效果；喂料量过高则停留时间短，各种组分混炼不均，导致材料整体性能下降。此外，螺杆长径比、螺槽深度、剪切块组合都对熔融共混材料的性能有一定影响 ]。

3 内饰件专用料在夏利汽车上的应用

用研制的专用料注塑加工成夏利汽车内饰件，

4 结论

在优化工艺参数的前提下，以辽阳均聚PP和共聚PP 7726作为基体树脂，选定POE为增韧剂、滑石粉为填充增强材料，并通过聚乙烯与基体树脂的优化组合确保改性材料的综合性能满足夏利汽车内饰件专用料的应用要求。